构建hnRNP B1相对定量的FQRT-PCR检测方法

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目的 建立一种荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQRT-PCR)检测肺癌患者外周血hnRNPB1mRNA表达的相对定量方法。方法 以hnRNPB1为待测基因,以β-actin为参照进行检测,建立标准曲线,确定实时RT-PCR的扩增效率;优化反应条件,使扩增效率接近100%,检测待检标本hnRNPB1和β-actin的循环阈值(Ct)。结果 该法检测的最低拷贝数为10^3,线性范围为10^3~10^7拷贝,批内和批间变异系数(CV)分别为3.4%和11.3%。结论 该方法具有灵敏、特异、数据处理简便可靠等特点,
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