【摘 要】
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目的：探讨Grp78基因过表达慢病毒载体的构建、包装和滴度检测。方法采用慢病毒载体，运用基因工程技术，获取目的基因片段并构建重组质粒，然后制备感受态细胞并转化，将重组质粒导入
【机 构】
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南方医科大学珠江医院麻醉科,南方医科大学附属深圳妇幼保健院麻醉科
【基金项目】
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深圳市科技计划基金资助项目（201203089）
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目的：探讨Grp78基因过表达慢病毒载体的构建、包装和滴度检测。方法采用慢病毒载体，运用基因工程技术，获取目的基因片段并构建重组质粒，然后制备感受态细胞并转化，将重组质粒导入感受态细胞；用PCR技术鉴定阳性克隆和进行DNA序列分析及对慢病毒包装和滴度检测。结果阳性克隆测序比对结果说明测通。熔解曲线中既没出现杂峰也没出现主峰的异常增宽，表明实验中未出现污染、引物二聚体和非特异性扩增。结论Grp78基因过表达慢病毒载体构建和包装成功。
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