【摘 要】
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提取分泌抗盐酸克伦特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株的总RNA,通过RT—PCR技术,扩增VH和VL,用一段柔性肽链一(G4S)3将VH和VL连接成ScFv。测序后经NCBI Blast分析,所得ScFv具有重组功能性
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院,吉林大学教育部人兽共患病重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30371059,30671762)
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提取分泌抗盐酸克伦特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株的总RNA,通过RT—PCR技术,扩增VH和VL,用一段柔性肽链一(G4S)3将VH和VL连接成ScFv。测序后经NCBI Blast分析,所得ScFv具有重组功能性鼠抗体可变区基因的特征。将所得目的基因与pET-22b(+)连接,转化E.coli BL21,用IPTG诱导表达,表达蛋白经SDS-PAGE分析,37C培养5h表达量较大,25C诱导表达以可溶性为主。
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