【摘 要】
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目的建立甲烷氧化菌素（methanobactin,Mb）-铜配合物（Mb-Cu）模拟超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的邻苯三酚自氧化体系分析方法。方法利用HP 20大孔树脂从甲基弯菌IMV301l
【机 构】
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哈尔滨商业大学省高校食品科学与工程重点实验室,中国科学院兰州化学物理研究所羰基合成与选择氧化国家重点实验室,
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目的建立甲烷氧化菌素（methanobactin,Mb）-铜配合物（Mb-Cu）模拟超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的邻苯三酚自氧化体系分析方法。方法利用HP 20大孔树脂从甲基弯菌IMV301l发酵液中分离纯化得到Mb,制备Mb-Cu测定其具有的SOD活性,利用紫外光谱分析对SOD邻苯三酚测活法进行系统研究。考察缓冲液浓度、邻苯三酚浓度、Mb-Cu浓度、EDTA-Na2浓度、pH值和温度等对Mb-Cu模拟SOD活性的影响。结果在Mb-Cu浓度为0.8 mg/L,Tris-HAC缓冲溶液为0.05 mol/L（其中缓冲溶液的pH值为8.2、EDTA-Na2的浓度为2 mmol/L）,邻苯三酚浓度为0.363 mmol/L,温度为20℃时,邻苯三酚的自氧化速率相对较低,此时Mb-Cu对超氧阴离子自由基（O2-.）的抑制率较高,以此建立Mb-Cu模拟SOD活性的邻苯三酚自氧化分析方法。发现Mb-Cu符合影响生物催化剂条件的一般规律,但比生物酶具有更高的热稳定性。结论Mb-Cu可作为清除O2-.的SOD模拟酶,本试验建立的分析条件是最佳反应体系。
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