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目的:利用siRNA干扰技术干扰H2S生成的关键酶胱硫醚β-合成酶（cystathionineβ-synthase,CBS）基因并构建细胞氧糖剥夺再灌注（oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）模型,探讨OGD/R和CBS基因干扰后SH-SY5Y细胞自噬和凋亡情况及相关信号通路变化。方法:构建OGD/R模型,体外模拟缺血再灌注过程,根据氧糖剥夺和再灌注时间不同共设9组,利用透射电镜观察各组细胞OGD/R后细胞内自噬小体形成情况,根据透射电镜结果选取氧糖剥夺4 h/再灌注24 h作为后续实验的OGD/R模型;脂质体转染法将针对CBS基因的siRNA转入SH-SY5Y细胞内,同时构建OGD/R模型,将细胞分为3个组,分别为CBS干扰组,OGD/R组和CBS干扰+OGD/R组,各组均设相应对照。Real time PCR和蛋白印迹法鉴定CBS基因干扰效率,并检测各组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1和信号通路中Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的蛋白表达水平,以及凋亡信号通路中NF-κBp65、COX-2蛋白表达水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡水平。结果:透射电镜观察细胞内自噬小体:除正常对照组和氧糖剥夺4 h/再灌注12 h组未观察到自噬小体外,其余各组均在胞质内观察到了较多自噬小体。CBS基因干扰效率达80%。CBS干扰组自噬相关蛋白及相关信号通路蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,Beclin-1,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR蛋白表达水平与阴性对照组比较均无统计学差异;OGD/R组与正常对照组比较,OGD/R组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ明显高于正常对照组,p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR均明显降低,NF-κBp65、COX-2蛋白表达水平均高于正常对照组;CBS干扰+OGD/R组与对照组比较,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,Beclin-1,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR均无显著差异。CBS干扰组细胞凋亡率与阴性对照组比较无统计学差异;与正常对照组比较OGD/R组细胞凋亡率明显高于正常对照组;CBS干扰+OGD/R组与阴性对照组比较,细胞凋亡率无显著差异。结论:OGD/R能够明显诱导SH-SY5Y细胞发生自噬和凋亡,且可能与Akt/mTOR及NF-κBp65/COX-2信号通路相关;CBS基因干扰后对细胞自噬和凋亡均无明显影响。