大鼠晚期糖基化终产物受体基因特异性小干扰RNA表达载体的构建及其活性鉴定

来源 :细胞生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhuantang88

【摘要】

：

应用两个RNA干扰实验技术网络的RNA设计软件，模拟SD大鼠晚期糖基化终产物受体（RAGE）mRNA的二级结构，设计针对RAGEmRNA417、221和534位点的3对小干扰RNA（siRNA）序列（21nt），再转化为能表

【作者】

：

夏金荣刘乃丰

【机构】

：

东南大学附属中大医院消化科

【出处】

：

细胞生物学杂志

【发表日期】

：

2007年5期

【关键词】

：

晚期糖基化终产物受体小干扰RNA 肝星状细胞 receptor for advanced glycation end products small inte

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应用两个RNA干扰实验技术网络的RNA设计软件，模拟SD大鼠晚期糖基化终产物受体（RAGE）mRNA的二级结构，设计针对RAGEmRNA417、221和534位点的3对小干扰RNA（siRNA）序列（21nt），再转化为能表达其小发夹结构RNA（shRNA）的寡核苷酸序列，分别将其克隆于pGCsi-U6／Neo／GFP载体，利用酶切和序列分析鉴定克隆的正确性。将RAGE特异性siRNA表达克隆转染肝星状细胞（HSC）-T6细胞系，以空白及转染非特异性siRNA表达克隆作为对照，分别以实时荧光定量PCR和W

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