【摘 要】
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目的观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激对大鼠肾脏及条件永生性小鼠足细胞C末端Src激酶（C-terminal Src kinase，Csk）表达的影响，探讨Csk在AngⅡ诱导足细胞骨架重构中的作用。方法24只无特定病原（SPF）级雄性Wista大鼠皮下埋置渗透性微泵，随机分为正常对照组和AngⅡ输注组（AngⅡ以400 ng·kg-1·min-1持续输注），于造模后2周和4周留取肾组织用于后续实验
【机 构】
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目的观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激对大鼠肾脏及条件永生性小鼠足细胞C末端Src激酶（C-terminal Src kinase，Csk）表达的影响，探讨Csk在AngⅡ诱导足细胞骨架重构中的作用。
方法24只无特定病原（SPF）级雄性Wista大鼠皮下埋置渗透性微泵，随机分为正常对照组和AngⅡ输注组（AngⅡ以400 ng·kg-1·min-1持续输注），于造模后2周和4周留取肾组织用于后续实验。采用透射电镜观察各组大鼠肾脏足细胞超微结构改变；Western印迹检测各组大鼠Csk蛋白表达水平；免疫荧光法检测肾脏Csk表达及分布改变。体外培养条件永生性小鼠足细胞（MPC），Western印迹法检测不同浓度AngⅡ（10-9、10-8、10-7、10-6、10-5 mol/L）刺激MPC细胞6 h及10-6 mol/L AngⅡ刺激不同时间（0、1.5、3、6、12、24 h）后足细胞Csk蛋白表达水平。Csk siRNA转染足细胞下调Csk表达，异硫氰酸荧光素（FITC）-鬼笔环肽（phalloidin）标记F-actin评价AngⅡ、细胞松弛素D（Cytochalasin D）诱导的足细胞骨架重构改变。
结果（1）透射电镜观察发现，AngⅡ输注组大鼠足细胞出现足突融合；（2）免疫荧光及Western印迹显示，AngⅡ输注组肾小球Csk表达增加（P<0.05）；（3） AngⅡ可诱导培养的小鼠足细胞Csk蛋白表达增加（P<0.05），且呈时间和剂量依赖性；（4）Csk siRNA转染足细胞下调Csk表达，可减轻AngⅡ诱导的足细胞F-actin重构，可减轻细胞松弛素D诱导的足细胞骨架破坏。
结论AngⅡ可诱导Csk表达上调，Csk可能参与了AngⅡ诱导的足细胞骨架重构及足突融合。
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