沉默 MDR1 基因逆转 SGC7901/ADM 细胞对紫杉醇的耐药性

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ouyang1225
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本研究利用短发夹 sh RNA(short hairpin RNA)沉默 SGC7901/ADM 细胞 MDR1 基因,从而逆转SGC7901/ADM 细胞对紫杉醇的耐药性。根据 MDR1 基因序列设计并合成编码 sh RNA 的 DNA 模板,构建三种靶向 MDR1 基因重组干扰载体,稳定转染 SGC7901/ADM 细胞,q RT-PCR 检测 MDR1 m RNA 表达水平,Western Blot 检测 MDR1 蛋白表达水平,MTT 法检测细胞对紫杉醇的敏感性。结果表明,成功构建了靶向 MDR1 基因的三种重组表达载体,分别转染 SGC7901/ADM 细胞后均能不同程度沉默 MDR1 基因的表达,其中 p2.1-3 对 MDR1 沉默效果最好,m RNA 和蛋白的沉默效率分别为 78.5%和 45%。紫杉醇对细胞的 IC50值由(3.147±0.494)μmol/L 降至(0.714±0.059) μmol/L,逆转率达到 78.22±1.906%。结果表明,靶向 MDR1 的干扰表达载体能够抑制 MDR1 基因的表达,从而逆转 SGC7901/ADM 细胞对紫杉醇的耐药性。
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