【摘 要】
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目的探讨肝细胞在大鼠肝窦内皮细胞(hepatic sinus endothelial cell,HSEC)生长过程中的作用,并建立一种新的HSEC原代培养方法。方法Ⅳ型胶原酶分离肝细胞,运用Percoll建立的
【机 构】
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上海交通大学医学院附属仁济医院普外科
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目的探讨肝细胞在大鼠肝窦内皮细胞(hepatic sinus endothelial cell,HSEC)生长过程中的作用,并建立一种新的HSEC原代培养方法。方法Ⅳ型胶原酶分离肝细胞,运用Percoll建立的梯度密度离心以及选择性贴壁纯化HSEC,含肝细胞条件培养液(HC-CM)的RPMI-1640培养液培养HSEC。结果平均每只大鼠可获取2.55×107个HSEC,平均活力98%,培养24h后纯度约91%。HC-CM有效刺激HSEC生长,促进细胞内DNA合成。HSEC体外生长保持良好的形态,维持5~6d,扫描电镜下可见典型的"窗孔"样结构。结论本实验方法能提供高活力的HSEC,肝细胞条件培养液内含有多种营养因子支持HSEC生长。
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