不同浓度硝普钠诱导兔软骨细胞凋亡模型的比较研究

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目的比较不同浓度硝普钠(SNP)诱导兔软骨细胞凋亡模型,为进一步探讨药物对软骨细胞凋亡的调控作用提供理论支持。方法 2014年9—12月选取4周龄健康雄性新西兰大耳白兔8只,体质量200~250 g,体外分离培养并鉴定兔软骨细胞,采用不同浓度SNP(0、0.062 5、0.125、0.25、0.5、1、2 mmol/L)诱导兔软骨细胞,分别于12、24、48 h采用四甲基偶氮唑盐比色试验法(MTT法)和末端脱氧核苷酸转移的d UTP缺口末端标记法(TUNEL法)评价并比较不同浓度SNP诱导软骨细胞凋亡模型,记录兔软骨细胞增殖情况(OD值)和兔软骨细胞凋亡率。结果不同浓度SNP诱导的兔软骨细胞在不同时间点的OD值比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。SNP浓度为0.062 5、0.125 mmol/L培养12、24、48 h时兔软骨细胞OD值高于SNP浓度为0 mmol/L(P<0.05);SNP浓度为0.25、0.5、1、2 mmol/L培养12、24、48 h时兔软骨细胞OD值均低于SNP浓度为0 mmol/L;SNP浓度为0.25、0.5、1、2 mmol/L培养12、24、48 h时兔软骨细胞OD值在不同浓度间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同浓度SNP诱导的兔软骨细胞在不同时间点的凋亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。SNP浓度为0.25、0.5、1、2 mmol/L培养12、24、48 h时兔软骨细胞凋亡率均高于SNP浓度为0 mmol/L(P<0.05);且不同浓度间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SNP浓度为0.25~2 mmol/L且诱导12、24、48 h时可制备不同严重程度的软骨细胞凋亡模型,为进一步探讨药物对软骨细胞凋亡的调控作用提供了理论支持。
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