【摘 要】
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目的探讨原位PCR中标本处理的最佳方法和反应的最佳条件.方法应用原位PCR方法对昆明小鼠进行基因检测和定位,对标本使用不同的方法处理,检测和定位过程中改变主要的反应条件.
【机 构】
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郑州大学医学院微生物学与免疫学教研室
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目的探讨原位PCR中标本处理的最佳方法和反应的最佳条件.方法应用原位PCR方法对昆明小鼠进行基因检测和定位,对标本使用不同的方法处理,检测和定位过程中改变主要的反应条件.结果进行原位PCR的标本使用0.05%多聚赖氨酸处理黏附性最好;4%多聚甲醛固定标本5 min、30 gg/ml蛋白酶K 37℃处理30min标本的结构和通透性最好;PCR反应液中Mg2+达到4.5 mmol/L扩增结果最好.结论标本的处理和反应条件对原位PCR的结果影响很大.
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