先天性长QT综合征相关人类HERG基因真核表达载体的构建及其功能表达

来源 :西安交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:gwxy110
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目的 构建先天性长QT综合征相关HERG基因的真核表达载体,观察其在真核细胞中的表达,建立稳定的细胞系,探讨基因的功能。方法 原核克隆载体pGEM—HERG经限制性内切酶获得HERG cDNA,将HERG cDNA亚克隆到真核表达载体pcDNA3中,用Lipofeetamin2000转染试剂介导将pcDNA3-HERG及荧光真核表达载体pRK5一GFP共转染至HEK一293细胞,利用G-418进行细胞筛选,并用稀释法建立稳定的HEK—HERG细胞系。用全细胞膜片钳技术检测HERG基因的功能表达情况。结果在
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