茶氨酸对大鼠脑缺血再灌注后单胺类神经递质及相关基因表达的影响

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目的 探讨茶氨酸对大鼠脑缺血再灌注后多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的水平及对谷氨酸受体2(GluR2) mRNA、麟脂酶C-γ1( PLC-γ1) mRNA表达的影响,讨论其所致神经损伤的保护作用机制.方法 将56只6周龄、体重为100~ 120 g的SPF级雄性SD大鼠按体重分层,以随机势字表法分为5组,分别为模型组(12只)、假手术组(8只),以及茶氨酸低( 10 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高剂量组(90 mg/kg)(每组12只).茶氨酸剂量组大鼠灌胃每天给予相应剂量的茶氨酸,模型组和假手术组每天灌胃给予等量超纯水.连续灌胃15 d后,制备大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebraartery occlusion,MCAO)模型,于再灌注后第3、24小时进行神经学评分,再灌注后第24小时处死动物,测定脑组织中DA、5-HT和茶氨酸含量,同时测定脑组织线粒体中活性氧(ROS)生成和过氧化氢酶( CAT)活性,并采用RT-PCR法检测脑组织中GluR2 mRNA以及PLC-γ1 mRNA的表达水平.结果 模型组、茶氨酸低、中、高剂量组大鼠脑缺血再灌注后第3小时神经学评分分别为(6.000±0.926)、(4.100±0.738)、(3.444±0.726)、(2.250±0.886)分(F=29.70,P<0.01);第24小时神经学评分分别为(6.625±0.916)、(5.000±0.817)、(3.667±0.707)、(2.625±0.916)分(F=34.68,P<0.01).模型组、茶氨酸低、中、高剂量组及假手术组大鼠脑内DA含量分别为(10.26±1.12)、(12.48±1.09)、(14.55±0.94)、(15.97±0.92)、(11.98±0.63) μg/g(F=43.76,P<0.01);5-HT含量分别为(1.091±0.160)、(0.818±0.101)、(0.571±0.050)、(0.453±0.111)、(0.863±0.063) μg/g(F =48.68,P<0.01);大鼠脑线粒体中ROS生成速率分别为(3.072±0.503)、(1.331±0.268)、(1.295±0.061)、(0.804±0.200)、(2.158±0.218)U· min-1· mg-1(F =80.82,P <0.01);CAT活性分别为(4.880±1.121)、(8.405±1.356)、(9.535±2.511)、(15.090±4.054)、(21.260±6.054) U/g(F =28.58,P<0.01);大鼠脑内GluR2 mRNA相对表达量分别为0.842±0.020、1.063±0.100、1.170±0.152、1.254±0.131、1.012±0.056(F=9.23,P<0.01); PLC-γ1mRNA相对表达量分别为0.737±0.090、0.887±0.045、0.963±0.025、0.991±0.049、0.867±0.079(F=10.24,P<0.01).结论 茶氨酸对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制与调节脑内单胺类神经递质含量以及上调GluR2 mRNA和PLC-γ1 mRNA表达有关。

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