目的 :探讨卵巢上皮性癌(卵巢癌)淋巴结高转移细胞和脐静脉内皮细胞体外交互和共同培养后细胞特征的变化。方法建立绿色荧光蛋白(GFP)标记的卵巢癌淋巴结高转移细胞株SKOV3/PM4细胞和细胞膜红色荧光染料DiI标记的人脐静脉内皮细胞株HUVEC细胞,分别收集SKOV3/PM4、HUVEC细胞的培养上清液,作为交互培养的条件培养基(如以HUVEC细胞培养的上清液培养SKOV3/PM4细胞),建立两种细胞交互培养和共同培养体系。细胞交互培养后,光镜观察细胞形态的变化并计算细胞分裂指数,透射电镜观察细胞超微结构的变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长速度,流式细胞仪分析细胞周期比例;细胞共同培养后,激光共聚焦显微镜观察两种细胞间的相互作用情况,明胶酶谱法检测细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的表达。结果细胞交互培养后,与单独培养的SKOV3/PM4细胞相比,交互培养的SKOV3/PM4细胞伪足增多,核分裂象[细胞分裂指数分别为(4.8±0.8)%、(11.2±0.3)%;P<0.05]增多,生长速度明显增快,G0/G1期细胞比例[分别为(69.4±3.6)%、(48.4±4.6)%;P<0.05]降低,G2/M期细胞比例[分别为(5.2±1.6)%、(24.9±2.2)%;P<0.05]升高;与单独培养的HUVEC细胞相比,交互培养的HUVEC细胞形态改变明显,出现空泡化超微结构,核分裂象[细胞分裂指数分别为(2.7±0.5)%、(5.7±0.6)%;P<0.05]增多,生长速度略降低,G0/G1期细胞比例[分别为(51.4±2.2)%、(79.0±4.1)%;P<0.05]升高,G2/M期细胞比例[分别为(19.1±1.2)%、(3.3±0.5)%;P<0.05]降低。细胞共同培养48 h后,激光共聚焦显微镜观察,绿色荧光标记的SKOV3/PM4细胞和红色荧光标记的HUVEC细胞出现融合现象;明胶酶谱法检测显示,MMP-2在HUVEC细胞中不表达,在SKOV3/PM4细胞中低表达,在共同培养的SKOV3/PM4+HUVEC细胞中高表达,SKOV3/PM4+HUVEC细胞、SKOV3/PM4细胞中MMP-2的灰度值分别为1885±84和1209±114,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05);而MMP-9在HUVEC细胞、SKOV3/PM4细胞、SKOV3/PM4+HUVEC细胞均不表达。结论 SKOV3/PM4、HUVEC细胞交互培养、共同培养分别与单独培养相比,其细胞特征均发生明显改变,推测可能与细胞生长的微环境及细胞间相互作用有关。
卵巢上皮性癌淋巴结高转移细胞和脐静脉内皮细胞交互和共同培养后细胞特征的变化
【摘 要】
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目的 :探讨卵巢上皮性癌(卵巢癌)淋巴结高转移细胞和脐静脉内皮细胞体外交互和共同培养后细胞特征的变化。方法建立绿色荧光蛋白(GFP)标记的卵巢癌淋巴结高转移细胞株SKOV3/PM4细胞和细胞膜红色荧光染料DiI标记的人脐静脉内皮细胞株HUVEC细胞,分别收集SKOV3/PM4、HUVEC细胞的培养上清液,作为交互培养的条件培养基(如以HUVEC细胞培养的上清液培养SKOV3/PM4细胞),建立两种
【机 构】
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广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科,南宁,530021,广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科,南宁,530021,广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科,南宁,530021,广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科,南宁,530
【发表日期】
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2014年49期
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