骨髓间充质干细胞在胰腺生理更新和病理再生中的作用

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目的:探讨骨髓间充质干细胞在胰腺生理更新和病理再生中的作用. 方法:将60只SD大鼠随机分为5组,每组12 只.A组为正常阴性对照组,不作任何处理,B 组为自体骨髓回输对照组,C组为雨蛙肽致轻度胰腺炎(MAP)模型组,D组为L-精氨酸致重度胰腺炎(SAP)模型组,E组为粒细胞集落因子(G-CSF)预处理组(SAP+GSF):在造模前3 d,sc G-CSF 40μg(kg·d),共3 d,其余处理同 D组.造模前3 d用核染料Hoechst33258标记自体骨髓间充质干细胞(MSC),并回输到自体骨髓腔.于骨髓干细胞回输后的2 wk和8 wk,分批处死大鼠,采集胰腺,立即进行冰冻切片, 荧光显微镜下直接观察胰腺组织中是否有呈现黄绿色荧光的细胞,选择有上述黄绿色荧光的冰冻切片进行免疫荧光染色,观察有无 Cytokeratin 19、胰岛素和胰高血糖素染色呈阳性的细胞.结果:A组的胰腺冰冻切片未见有黄绿色荧光.造模后2 wk,B、C、E和D组存活大鼠可见标记的MSC出现在正常胰腺组织和损伤胰腺组织中,在正常胰腺组织中偶见,而在损伤胰腺组织中多见,尤以GSF预处理组最多见, C、D、E组一直持续到8 wk仍可见到黄绿色荧光.A和D组死亡大鼠未见Cytokeratin 19、胰岛素和胰高血糖素染色呈阳性的细胞.造模后2 wk,B、C、E和D组存活大鼠掺入损伤胰腺中的MSC均有分化为Cytokeratin 19染色阳性的细胞,未见胰岛素和胰高血糖素染色呈阳性的细胞.造模后8 wk,胰岛素和胰高血糖素染色呈阳性的细胞在C、D组偶见,E组散见.结论:自体骨髓间充质干细胞参与胰腺的生理更新和病理再生.
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