【摘 要】
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目的 探讨微小RNA-7(miR-7)靶向胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)信号通路对癫痫大鼠海马组织的保护作用.方法 选择雄性SD大鼠40只,随机选择10只为正常大鼠,剩余30只为癫痫模型大鼠,癫痫模型大鼠腹腔注射戊四氮(40 mg·kg-1·d-1),28 d后记录两组大鼠Racine等级评分.造模成功后将30只癫痫模型大鼠随机分为模型组、阴性对照组(转染agomir NC)、miR-7过表达组(转染miR-7 agomir),采用苏木精-伊红染色观察各组大鼠脑海马组织病理形态学改变,qRT-P
【机 构】
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830000乌鲁木齐,新疆医科大学第六附属医院神经内科;830000乌鲁木齐,新疆医科大学第六附属医院风湿免疫科
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目的 探讨微小RNA-7(miR-7)靶向胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)信号通路对癫痫大鼠海马组织的保护作用.方法 选择雄性SD大鼠40只,随机选择10只为正常大鼠,剩余30只为癫痫模型大鼠,癫痫模型大鼠腹腔注射戊四氮(40 mg·kg-1·d-1),28 d后记录两组大鼠Racine等级评分.造模成功后将30只癫痫模型大鼠随机分为模型组、阴性对照组(转染agomir NC)、miR-7过表达组(转染miR-7 agomir),采用苏木精-伊红染色观察各组大鼠脑海马组织病理形态学改变,qRT-PCR检测各组大鼠脑组织miR-7和IGF-1R mRNA表达水平,双荧光素酶报告实验验证miR-7与IGF-1R的靶向关系,TUNEL法检测各组大鼠脑海马神经元细胞凋亡数,Western blot检测各组大鼠脑组织IGF-1R、磷酸化胰岛素样生长因子-1受体(p-IGF-1R)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平.结果 癫痫模型大鼠Racine等级评分显著高于正常大鼠,证明癫痫模型建立成功.正常对照组大鼠海马组织神经元细胞结构形态正常,排列整齐,细胞核饱满,与正常对照组比,模型组和阴性对照组大鼠海马组织神经元细胞减少,排列紊乱松散,细胞核破裂,细胞呈空泡状,miR-7表达水平下降,IGF-1R mRNA表达水平升高,细胞凋亡数目增多,Bax、IGF-1R、p-IGF-1R蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与阴性对照组比,miR-7过表达组大鼠海马组织神经元细胞增多,排列较为整齐,细胞核破裂缓解,细胞结构形态趋于正常,miR-7表达水平升高,IGF-1R mRNA表达水平下降,细胞凋亡数目减少,Bax、IGF-1R、p-IGF-1R蛋白表达水平下降(P<0.05),双荧光素酶实验结果表明IGF-1R是miR-7的靶基因.结论 miR-7可能通过靶向IGF-1R信号通路抑制癫痫大鼠海马组织神经元细胞凋亡,从而对癫痫大鼠起到保护作用.
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