【摘 要】
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目的:通过整合药理学方法研究补肾安胎法代表方寿胎丸、健脾安胎法代表方举元煎调控自然流产(SA)蜕膜病理环节靶点逆转妊娠结局的安胎机制差异,初步阐释“胞络系肾”、“胎茎系脾”生殖理论科学内涵。方法:运用GeneCards数据库筛选SA的调控靶点进行基因本体-生物学过程(GO-BP)富集分析,结合Cytoscape网络分析、文献引证筛选主要病理环节及核心靶点;利用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS
【基金项目】
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国家自然科学基金委面上项目(81973901); 中国博士后科学基金面上项目(2021MD703798); 四川省科技厅攻关项目(2021YJ0257); 成都中医药大学杏林学者博士后专项基金项目(0300058074);
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目的:通过整合药理学方法研究补肾安胎法代表方寿胎丸、健脾安胎法代表方举元煎调控自然流产(SA)蜕膜病理环节靶点逆转妊娠结局的安胎机制差异,初步阐释“胞络系肾”、“胎茎系脾”生殖理论科学内涵。方法:运用GeneCards数据库筛选SA的调控靶点进行基因本体-生物学过程(GO-BP)富集分析,结合Cytoscape网络分析、文献引证筛选主要病理环节及核心靶点;利用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)筛选并获取寿胎丸、举元煎的潜在活性成分,构建其调控差异网络预测;复制SA大鼠模型进行同单位寿胎丸、举元煎干预,采用苏木素-伊红(HE)染色、透射电镜(TEM)、酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)等方法进行安胎病理调控机制验证。结果:细胞黏附、炎症反应、细胞死亡、血管生成的调控失常是SA核心病理环节;分别获取寿胎丸潜在特异活性成分13个及举元煎活性成分14个,预测调控网络提示寿胎丸与举元煎的潜在活性成分均能调控血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-2、雌激素受体ESR)-1、基质金属蛋白酶(MMP)-9等靶点从而调控SA病理环节;实验研究提示寿胎丸和举元煎可显著提高SA大鼠妊娠率、蜕膜细胞完整率及血供、有效控制细胞凋亡形态及雌激素(E2)、孕激素(P)及其受体表达,下调SA大鼠蜕膜组织MMP-2、MMP-9、IL-2、IL-6表达,同时上调抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及IL-4表达。寿胎丸可显著上调VEGF表达,举元煎可显著下调E-钙黏蛋白(E-Cad)表达。结论:寿胎丸、举元煎均可通过调控SA核心病理过程以安胎,同单位干预下寿胎丸总体疗效优于举元煎,寿胎丸在调控血管生成途径优于举元煎,举元煎在细胞粘附途径优于寿胎丸,该结论可部分阐释 “同病异治”生物学基础,为安胎中药质量标志物(Q-marker)识别、进一步方-证代谢组研究提供客观数据参考。
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