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利用亚临界1，1，1，2-四氟乙烷（R134a）萃取技术，建立了鱼肉中6种性激素残留的气相色谱-质谱（GC—MS）分析方法。样品中的药物经过亚临界R134a萃取后，先进行冷冻过滤去脂，然后通过C18和NH2固相萃取小柱净化，最后经七氟丁酸酐衍生后，采用GC—MS进行定性与定量分析。本实验确定了亚临界R134a萃取6种性激素的最佳条件为：萃取压力4MPa，萃取温度30℃，夹带剂用量6mL。在此条件下，6种性激素在5～1000μg/L浓度范围内线性关系良好，相关系数均大于0．99；检出限为0．2～1μg/kg