肝癌细胞中RhoA小干扰RNA载体的构建与鉴定

来源 :肿瘤研究与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiao2168644
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目的 构建靶向RhoA基因的RNA干扰(RNAi)载体.方法 根据人RhoA基因序列设计两条短双链,人工合成后,连接到真核表达载体Pgenesil-1中,构成Pgenesil-1-siRhoA1、Pgenesil-1-siRhoA2两个重组质粒,转入人肝癌细胞(HEPG2)中,Western blot方法检测RhoA-siRNA对RhoA表达的抑制效果,确定一个重组质粒进行下一步研究.结果 两质粒都有沉默RhoA基因的作用,Pgenesil-1-siRhoA1重组质粒作用更强烈一些,使用Pgenesil-1-siRhoA1质粒进行下一步研究.结论 Pgenesil-1-siRhoA重组质粒的成功构建,为研究RhoA与肝细胞癌侵袭转移的关系提供实验模型。

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