【摘 要】
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目的 探讨双氢睾酮( DHT)在HaCaT细胞固醇调控元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)表达中的作用.方法 体外培养HaCaT细胞,分为4组,对照组不加任何刺激因素,DHT组分别加入3种不同浓度的DHT,LY294002+ DHT组在加入50 μmol/L PI3K抑制剂(LY294002)预处理40 min后加入100 nmol/LDHT,PD98059+DHT组即在加入50 μmol/L
【机 构】
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江苏省吴江市第二人民医院皮肤科,215200,210029,南京医科大学第一附属医院皮肤科,江苏省吴江市第一人民医院皮肤科,江苏省无锡市人民医院皮肤科,210029,南京医科大学第一附属医院皮肤科
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目的 探讨双氢睾酮( DHT)在HaCaT细胞固醇调控元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)表达中的作用.方法 体外培养HaCaT细胞,分为4组,对照组不加任何刺激因素,DHT组分别加入3种不同浓度的DHT,LY294002+ DHT组在加入50 μmol/L PI3K抑制剂(LY294002)预处理40 min后加入100 nmol/LDHT,PD98059+DHT组即在加入50 μmol/L MEK抑制剂(PD98059)预处理40 min后加入100 nmol/LDHT.用实时定量PCR和Western印迹法检测DHT对HaCaT细胞SREBP 1 cmRNA和蛋白表达的影响.Western印迹法检测DHT作用于HaCaT细胞后蛋白激酶B(AKT)、胞外信号调控激酶(ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)的磷酸化情况.结果 DHT可呈浓度依赖性上调HaCaT细胞SREBP-1c mRNA和蛋白的表达,并诱导AKT、ERK的磷酸化,但对p38、JNK的磷酸化无明显激活作用.LY294002预处理后HaCaT细胞SREBP-1c mRNA的表达较单纯DHT组明显降低(t=9.406,P＜ 0.05);SREBP-1蛋白水平降为0.7113±0.0313,与单纯DHT组2.2577±0.0601比较,差异有统计学意义(t=39.498,P＜0.05).而PD98059预处理后,SREBP-1c mRNA和蛋白的表达与单纯DHT组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 DHT可诱导HaCaT细胞SREBP-1 c mRNA和蛋白的表达。
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