【摘 要】
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目的 建立白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗生产中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)含量的测定方法.方法 免疫家兔制备高效价抗PT血清,纯化抗PT多克隆抗体并进行酶标记,建立双抗体夹心ELISA法并对其进行验证.结果 建立的方法在0～ 20 ng/ml PT测量区间呈现最佳线性,相关系数＞0.99,且重复性好.检测百日咳丝状血凝素和黏着素,结果均为阴性,说明该法特异性良好.试验内10次
【机 构】
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100024北京天坛生物制品股份有限公司细菌性疫苗研究室,100024北京天坛生物制品股份有限公司细菌性疫苗研究室,100024北京天坛生物制品股份有限公司细菌性疫苗研究室,100024北京天坛生物制
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目的 建立白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗生产中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)含量的测定方法.方法 免疫家兔制备高效价抗PT血清,纯化抗PT多克隆抗体并进行酶标记,建立双抗体夹心ELISA法并对其进行验证.结果 建立的方法在0～ 20 ng/ml PT测量区间呈现最佳线性,相关系数＞0.99,且重复性好.检测百日咳丝状血凝素和黏着素,结果均为阴性,说明该法特异性良好.试验内10次、不同试验间3次测定16.0、8.0、4.0、3.0 ng/ml PT,变异系数为2.8％～9.7％,回收率为95.7％～106.0％,精密度和准确度验证均符合常规质量控制要求,定量限度为3.0 ng/ml.结论 该方法能有效检测百日咳杆菌大罐发酵过程中分泌的PT,为PT质量控制奠定了重要基础。
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