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研究采用过氧化氢法和高压均质法降解对6A型肺炎球菌多糖(type 6A pneumococcal polysaccharide,PnPS6A)结构和抗原性的影响。
方法分别采用过氧化氢法〔将过氧化氢加入多糖(polysaccharide,PS)溶液中,50 ℃反应3 h〕和高压均质法(用高压均质机在5×107 Pa压力下处理PS溶液)降解PnPS6A,降解物经超滤浓缩和冻干后,获得降解的PnPS6A。分别用核磁共振氢谱(nuclear magnetic resonance hydrogen spectrum,1H-NMR)和双向免疫扩散法检测PnPS6A降解物的结构和抗原性,用抑制ELISA检测降解和未降解的PnPS6A的抗原一致性。
结果2种降解方法均能降低PnPS6A的相对分子质量。2种降解的PnPS6A对PnPS6A抗血清抑制的半数有效浓度与未处理的PnPS6A为同一个数量级,表明降解的PnPS6A的抗原性没有改变。1H-NMR分析显示,2种降解的PnPS6A的结构与未处理的PnPS6A一致。
结论2种降解方法都能降低PnPS6A的相对分子质量,而且对PnPS6A的结构和抗原性不会产生影响。