法舒地尔促进大鼠骨髓间充质干细胞分化生成的内皮细胞迁移及血管新生

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本文旨在研究Rho激酶特异抑制剂法舒地尔(HA-1077)对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)分化生成的内皮细胞的迁移和血管新生的影响,及其与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的关系。实验用第2~3代rBMSCs,内皮细胞生长培养基EGM-2诱导10~14d,检测诱导后细胞的内皮标志。取诱导鉴定后的细胞,用跨膜趋化实验和划痕实验观察细胞的迁移率,用ECMatrixTM凝胶体外血管新生实验观察血管新生情况。结果显示,HA-1077能促进细胞迁移,其作用随浓度增高而增强,与VEGF有明显的协同效应。细胞在ECMatrixTM凝胶上37oC孵育12h,细胞定向迁移,呈多边形排列,出芽,伸出的细长突起相互连接,形成封闭的多边形和复杂的毛细血管样网络结构。HA-1077还能促进血管新生,新生毛细管总长度明显多于对照组(P<0.05)。在高浓度HA-1077(60mmol/L)组中,细胞的主要表现为原位出芽,伸出细长突起,形成网络。当HA-1077与VEGF联合应用时,细胞的表现以形成复杂的毛细血管样网络结构为主。上述结果提示,HA-1077能促进rBMSCs分化生成的内皮细胞发生迁移和血管新生,并与VEGF有一定程度的协同作用。
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