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目的:构建携带人神经营养素3(hNT3)基因的重组慢病毒表达载体。方法:通过双限制性内切酶消化和连接的方法构建pGC—E1-hNT3-EGFP质粒,将该质粒转化大肠杆茵DH5仅,通过PCR、酶切、测序和对比验证hNT3,通过Lipofectamine 2000将pGC—E1-hNT3-EGFP、pHelper1.0和pHelper2.0三质粒系统共转染293T细胞包装病毒,经大量扩增后,应用实时定量PCR法鉴定和测定滴度。结果:克隆得到512bp目的hNT3全长基因,经过PCR扩增、酶切鉴定、序列测定证实