Alpha珠蛋白基因片段表达载体的构建

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【摘要】

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目的：构建alpha珠蛋白基因片段反义表达载体，抑制重型beta地贫患者alpha珠蛋白基因的过量表达，为重型beta地贫基因治疗打下基础。方法：采用PCR扩增alpha珠蛋白基因片段807bp，反应

【作者】

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余升红

【机构】

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中山医科大学医学遗传教研室

【出处】

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生物技术

【发表日期】

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2002年1期

【关键词】

：

聚合酶链反应逆病毒表达载体重型beta地贫基因治疗 α珠蛋白

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目的：构建alpha珠蛋白基因片段反义表达载体，抑制重型beta地贫患者alpha珠蛋白基因的过量表达，为重型beta地贫基因治疗打下基础。方法：采用PCR扩增alpha珠蛋白基因片段807bp，反应条件94℃ 30s,68℃ 1min,72℃ 2min,35个循环，然后将所扩增片段用Klenow大片段酶补平PCR产物末端，另外用HindⅢ酶切pLNSX,用Klenow补平后，与补平末段的PCR产物平端连接，转化用CaCl2制备的感受态细胞受体DH5α，用碱法提取所得克隆子质粒，电泳比较质粒大小，再用P

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