【摘 要】
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黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药、前体化合物的合成和手性化合物的拆分等方面有广泛的用途。获得高效表达黑曲霉脂肪酶的基因工程菌是该酶工业化生产的前提。根
【机 构】
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华中师范大学生命科学学院遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室,华中科技大学生命科学与技术学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30771429);科技部“863”资助项目(2007AA05Z417);教育部博士点基金资助项目(20060511002);湖北省科技攻关项目(2007AA201C50,2007AA301C26)
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黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药、前体化合物的合成和手性化合物的拆分等方面有广泛的用途。获得高效表达黑曲霉脂肪酶的基因工程菌是该酶工业化生产的前提。根据黑曲霉脂肪酶LIP的氨基酸序列及毕赤酵母密码子的偏爱性,设计合成26条相互重叠20 bp的引物,通过组装PCR分别合成lip基因的4个片段lipA1（300bp）l、ipA2（237 bp）l、ipA3（234 bp）和lipA4（210 bp）。再以基因头lip1和基因尾lip26为引物,以lipA1l、ipA2l、ipA3和lipA4混合物为
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