目的:应用血清药物化学理论分析检测对叶百部抗肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae,MP）活性部位的体内成分。方法:利用D101大孔树脂进行梯度洗脱,不同洗脱部位进行抗MP实验,测定其最小抑菌浓度值。采用超高效液相色谱与飞行时间质谱联用（UPLC-Q-TOF-MS/MS）及MetaboLynx数据处理技术分析鉴定抗MP活性部位的血中移行成分。分析采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸乙腈（B）,梯度洗脱,流速为0.40mL·min^-1,柱温为45℃。结果:比较大孔树脂富集各洗脱部位最小抑菌浓度,水洗脱部位为29.41 mg·mL^-1,20%乙醇洗脱部位为15.62mg·mL^-1,50%乙醇洗脱部位为10.42mg·mL^-1,90%乙醇洗脱部位为7.81mg·mL^-1。检测并鉴定了90%乙醇洗脱部位灌胃大鼠血中移行成分54个,包括14个原型成分和40个代谢产物。结论:对叶百部经大孔树脂富集90%乙醇洗脱部位抗MP活性最强,为抗MP活性部位。金刚大碱、百部新碱、对叶百部碱、新对叶百部碱、异对叶百部碱、N-氧-对叶百部碱、对叶百部碱J以及对叶百部碱H等成分可能为对叶百部抗MP的部分物质基础。