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目的
应用Ⅱ型腺相关病毒-杀菌渗透增强蛋白嵌合基因(AAV2-BPI700-Fcγ1700)转染的小鼠,给予感染最小致死剂量的大肠杆菌后,观察和探究结肠上皮电阻和离子转运的变化和机制。
方法应用腺相关病毒嵌合基因转染、短路电流记录、ELISA等方法测定小鼠结肠粘膜的离子转运信息。
结果基因转染小鼠与对照组相比,结肠上皮基础电阻和短路电流明显增加,在上皮的顶膜侧加入钠离子通道阻断剂阿米洛利后,则可以明显抑制增加的电流;应用上皮离子促分泌物5-HT后,可以明显增加结肠上皮的短路电流,这种短路电流可以被Cl-通道阻断剂DPC、Na+-K+-2Cl-共转运体抑制剂bumetanide明显抑制;并且5-HT作用结肠粘膜后,上皮cAMP的含量明显高于对照组。应用5-HT4受体拮抗剂GRI 13808加入到粘膜组织的基底侧进行预处理,可以明显抑制基因转染组5-HT诱导的cAMP增加,基因转染小鼠5-HT4受体免疫阳性明显高于对照组。
结论5-HT通过5-HT4受体诱导基因转染小鼠cAMP依赖性的Cl-离子转运增加,从而促进了肠道排毒反应。