高钙、高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化过程中骨桥蛋白表达的动态变化

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目的观察大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)在高钙、高磷条件下骨桥蛋白(OPN)表达的动态变化及其分布特点,探讨其与血管钙化的关系。方法应用大鼠原代VSMCs进行体外实验,细胞生长至80%融合后更换不同培养基进行培养。根据培养基中钙磷浓度不同分为3组:对照组、高钙组和高磷组。更换培养基当天定义为D0。应用原子分光光度计检测细胞内钙含量。应用免疫组化染色观察各组第3、6、10和17天OPN的在细胞中的表达:同时收集第4、8、12天各组细胞,提取总蛋白,Western blot方法检测OPN表达。最后应用电镜、免
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