【摘 要】
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目的:探讨敲除野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)基因对小鼠心功能的影响及心脏组织中基因和蛋白表达水平的变化。方法:随机选取野生型(WT)小鼠和Wip1基因敲除(Wip1-KO)小鼠各10
【机 构】
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北京协和医学院中国医学科学院国家心血管病中心阜外医院,中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心,中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院,
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目的:探讨敲除野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)基因对小鼠心功能的影响及心脏组织中基因和蛋白表达水平的变化。方法:随机选取野生型(WT)小鼠和Wip1基因敲除(Wip1-KO)小鼠各10只,分别检测两组小鼠的心功能和心重/体重比,应用苏木精伊红(HE)染色观察小鼠心肌组织的病理形态,应用实时定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌组织中心房利钠肽(ANP)、B型利钠肽(BNP)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的基因表达水平,并应用蛋白免疫印迹(Western blot)检测凋亡相关蛋白包括B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(c-Caspase3)的表达水平。结果:与WT组小鼠相比,Wip1-KO组小鼠心肌组织中Wip1 mRNA表达明显降低(P<0.05),左心室射血分数和左心室缩短分数降低(P<0.05),左心室收缩末期内径增大(P<0.05)。虽然Wip1-KO组小鼠与WT小鼠的心脏重量没有差异,但Wip1-KO组小鼠体重较WT组小鼠减轻(P<0.05),心重/体重比增加(P<0.05)。HE染色显示Wip1-KO组小鼠的心肌形态与WT组小鼠之间没有明显差异。心肌组织中ANP、BNP、MCP-1和α-SMA基因表达水平在两组小鼠之间差异无统计学意义(P>0.05)。Wip1-KO组小鼠心肌组织中凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2和c-Caspase3表达水平与WT组小鼠之间没有明显差异(P>0.05)。结论:敲除Wip1基因可以损害小鼠心功能,但相关的机制还有待进一步阐明。
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