【摘 要】
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目的克隆zeta链蛋白基因并在大肠杆菌中表达,经纯化与鉴定,为建立α-SEA型地中海贫血的免疫学筛查方法提供特异性抗原.方法从经处理的K562细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术反
【机 构】
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南方医科大学免疫教研室,南方医科大学分子遗传学教研窒
【基金项目】
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广东省重大课题资助项目:2004-A30801003
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目的克隆zeta链蛋白基因并在大肠杆菌中表达,经纯化与鉴定,为建立α-SEA型地中海贫血的免疫学筛查方法提供特异性抗原.方法从经处理的K562细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术反转录并将其克隆到pET-21a(+)载体中,测序验证.融合蛋白在大肠杆菌中表达,采用Probond树脂柱纯化融合蛋白,用Westem Blotting和ELISA鉴定.结果成功构建了融合表达载体pET-zeta,融合蛋白得到可溶性表达及纯化,经Western blotting和商品ELISA试剂盒鉴定显示重组蛋白为zeta链
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