【摘 要】
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目的 探讨色胺酮对小鼠血小板聚集、释放功能的影响及机制。方法 取昆明（KM）种小鼠10只麻醉采血制备富血小板血浆（PRP）和贫血小板血浆（PPP），再取KM小鼠50只采用多次离心法制备洗涤血小板、制成悬液后分为对照组[1‰二甲基亚砜（DMSO）]、5μmol/L色胺酮组、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组，除对照组外其余各组小鼠洗涤血小板（或PRP）悬液分别与对应药物孵育，再加3
【基金项目】
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国家自然科学基金（81760653）；
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目的 探讨色胺酮对小鼠血小板聚集、释放功能的影响及机制。方法 取昆明（KM）种小鼠10只麻醉采血制备富血小板血浆（PRP）和贫血小板血浆（PPP），再取KM小鼠50只采用多次离心法制备洗涤血小板、制成悬液后分为对照组[1‰二甲基亚砜（DMSO）]、5μmol/L色胺酮组、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组，除对照组外其余各组小鼠洗涤血小板（或PRP）悬液分别与对应药物孵育，再加3种激动剂[2 mg/L胶原、80 U/L凝血酶及5μmol/L二磷酸腺苷（ADP）]，以台式缓冲液（或PPP）作空白对照，采用光比浊法检测3种激动剂刺激下对照组、5μmol/L色胺酮组、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板的聚集情况并计算血小板聚集率，采用荧光强度法检测2 mg/L胶原刺激后对照组、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板三磷酸腺苷（ATP）的释放功能，采用Western blot检测空白组、对照组、5μmol/L色胺酮组、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板中磷酸酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B （PKB或Akt）、糖原合成酶激酶（GSK） 3β及蛋白激酶C（PKC）蛋白磷酸化的表达水平。结果 胶原刺激血小板聚集时，5、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板的聚集率较对照组降低（P ＜0.05或P ＜0.01）; ADP和凝血酶刺激血小板聚集时，5、10μmol/L色胺酮组小鼠血小板的聚集率与对照组比较，差异无统计学意义（P＞ 0.05）;胶原刺激时，10μmol/L色胺酮组和0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板的ATP释放量较对照组降低（P ＜0.01）;胶原诱导的血小板聚集后，5、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板中PI3K（p85）、Akt、GSK3β蛋白以及PKC蛋白底物的磷酸化水平较对照组减少（P ＜0.01）。结论 色胺酮可以抑制小鼠血小板的聚集和释放功能，其机制可能与抑制PI3K-Akt-GSK3β和PKC蛋白的磷酸化水平有关。
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