【摘 要】
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为开发绿色、安全、高效的抗石斑鱼虹彩病毒(Singapore Groupe Riridovirus,SGIV)渔用药物,本研究先采用光学显微镜观察、CCK-8细胞活力测定实验确定秦皮水提物(Cortex Fraxi
【机 构】
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北部湾大学海洋学院,广西科学院,河南师范大学生命科学学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(41966004,U20A20102),广西重点研发计划项目(桂科AB18221111),广西自然科学基金项目(2020GXNSFBA297161,2019GXNSFAA245054,AD19245022),广西科学院基本科研业务费项目(2019YJJ1005,2018YJJ903)资助。
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为开发绿色、安全、高效的抗石斑鱼虹彩病毒(Singapore Groupe Riridovirus,SGIV)渔用药物,本研究先采用光学显微镜观察、CCK-8细胞活力测定实验确定秦皮水提物(Cortex Fraxini water extracts,CFE)及其主要活性成分秦皮乙素(Esculetin,EC)的细胞安全浓度,并在确定药物安全工作浓度基础上,分别采用光学显微镜观察、实时荧光定量PCR(Realtime Quantitative,RT-qPCR)、基于核酸适配体LYGV1的荧光分子探针技术(LYGV1-AFMP)等方法探究CFE和EC抗石斑鱼虹彩病毒的效果.结果表明,当CFE浓度低于1 mg/mL、EC浓度低于10 μg/mL时,光学显微镜观察结果显示细胞形态正常,无明显病变效应.光学显微镜观测结果与CCK-8检测细胞存活率结果一致,即秦皮水提物安全工作浓度为1 mg/mL(ρCFE≤1 g/L),秦皮乙素安全工作浓度为≤10 μg/mL(ρEC≤0.01 g/L).光学显微镜观察、RT-qPCR、LYGV1-AFMP这3种检测技术均证实秦皮水提物及秦皮乙素具有明显的抗石斑鱼虹彩病毒效果,且在安全工作浓度下,抗病毒效果与药物剂量呈正相关关系.秦皮水提物及秦皮乙素能够有效抑制石斑鱼虹彩病毒的感染,具有开发成高效抗病毒渔用药物的潜力.
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