【摘 要】
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以氨基载体原位固定化PEG相中的木瓜蛋白酶,获得了高固定化率(95.9%)和酶活回收率(38.9%)的固定化木瓜蛋白酶,解决了双水相分离纯化后成相聚合物和目的蛋白难以分离的问题。
【机 构】
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南京林业大学轻工科学与工程学院,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(2012AA022206B);南京林业大学引进高层次人才科研基金项目;南京林业大学“青年拔尖人才培养计划”专项经费资助项目;江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
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以氨基载体原位固定化PEG相中的木瓜蛋白酶,获得了高固定化率(95.9%)和酶活回收率(38.9%)的固定化木瓜蛋白酶,解决了双水相分离纯化后成相聚合物和目的蛋白难以分离的问题。固定化木瓜蛋白酶的最适p H在7.0左右,最适温度处于60~70℃之间。相比游离木瓜蛋白酶,在广泛的p H区间内(3.0~9.0)固定化酶稳定性都较好,热稳定性也有改善。在4℃密闭容器内将固定化木瓜蛋白酶以湿润状态保存可以较好地保留其活性。LH-HA固定化木瓜蛋白酶可以特异性地水解单克隆抗体Ig G,制备Fab和Fc片段。
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