【摘 要】
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目的:建立一种高灵敏度、高特异性、精确、简便的微板酶联夹心杂交技术,对人单核细胞分泌的TNF-α mRNA 进行定量检测.方法: 设计两条特异探针,其中一条为捕获探针,5'端
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目的:建立一种高灵敏度、高特异性、精确、简便的微板酶联夹心杂交技术,对人单核细胞分泌的TNF-α mRNA 进行定量检测.方法: 设计两条特异探针,其中一条为捕获探针,5'端带有氨基修饰,可以与微量DNA结合板表面的NOS基团共价结合,而且是"竖直"地包被在微孔内,另一个为检测探针,3'端带有生物素标记.提取人单个核细胞总RNA, RT-PCR后的扩增产物经变性后加入已包被好捕获探针的微孔板中,加入检测探针与已杂交的产物结合,最后加入亲和素-辣根过氧化物酶(avidin
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