【摘 要】
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多孔板-MTT比色法测定植物抗菌成分对细菌抑制活性的步骤为:每孔加入浓度为106cfu/mL的供试菌液90μL,然后加入不同浓度的药液10μL,28℃暗培养24 h后,每孔中加入5 mg/mL的MT
【机 构】
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中国农业大学农学与生物技术学院,贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室
【基金项目】
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高等学校博士学科点专项科研基金(20060019048);教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-05-0134);国家自然科学基金(30871662)
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多孔板-MTT比色法测定植物抗菌成分对细菌抑制活性的步骤为:每孔加入浓度为106cfu/mL的供试菌液90μL,然后加入不同浓度的药液10μL,28℃暗培养24 h后,每孔中加入5 mg/mL的MTT溶液10μL,继续培养4 h后加入10%二甲基亚砜100μL,振荡30 min,在570 nm处测定溶液的吸光值。采用以上方法,测定植物抗菌成分蓝桉醇对辣椒斑点病黄单胞菌(Xanthomonas vesicatoria)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的半抑制浓度(IC50)分别为0.158和0.395 mg/mL,小檗碱对溶血葡萄球菌(Staphylococcus haemolyticus)的IC50为0.587mg/mL。结果表明,多孔板-MTT比色法能快速、微量地测定植物成分对细菌的抑制活性。
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