【摘 要】
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目的使用CRISPR/Cas9技术构建血管内皮生长因子b(Vascular endothelial growth factor b,Vegf-b)敲除斑马鱼模型。方法设计CRISPR/Cas9位点,体外转录单链向导RNA(single guid
【机 构】
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广东工业大学生物医药学院,广东省人民医院医学研究部
【基金项目】
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中国博士后科学基金(402190011),国家自然科学基金(500190191)
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目的使用CRISPR/Cas9技术构建血管内皮生长因子b(Vascular endothelial growth factor b,Vegf-b)敲除斑马鱼模型。方法设计CRISPR/Cas9位点,体外转录单链向导RNA(single guide RNA,sgRNA)和Cas9 RNA,通过斑马鱼受精卵显微注射,评价sgRNA效率。对子代斑马鱼进行基因测序并筛选,最后获得基因敲除的纯合子斑马鱼Vegf-b-/-。结果针对1个基因位点设计并构建了2个sgRNA,选择效率最高的sgRNA1进行斑马鱼受精卵显微
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