探讨微小RNA 147a （miR-147a）对子宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的作用及其可能的作用机制。
方法（1）应用实时RCR技术检测miR-147a和表皮生长因子受体（EGFR）mRNA在正常子宫上皮细胞系HcerEpic细胞以及子宫颈癌细胞系C-33A、CaSKi、HeLa细胞中的表达，选取其中低表达miR-147a和高表达EGFR mRNA的子宫颈癌细胞系（即HeLa细胞）进行后续实验。（2）实验分为3组，即转染组[转染miR-147a模拟物（mimics-miR-147a）]、阴性对照组[转染阴性对照模拟物（mimics-NC）]、空白对照组（未转染），四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测转染后3组HeLa细胞的存活率，克隆形成实验检测转染后3组HeLa细胞的增殖能力，穿膜小室（transwell小室）的体外侵袭实验检测转染后3组HeLa细胞的侵袭能力，实时RCR技术和蛋白印迹法检测转染后3组HeLa细胞中EGFR mRNA和蛋白的表达。（3）实验分为4组，即mimics-NC+EGFR野生型（EGFR-WT）组、mimics-NC+EGFR突变型（EGFR-Mut）组、mimics-miR-147a+EGFR-WT组、mimics-miR-147a+EGFR-Mut组，采用双荧光素酶报告基因实验检测4组肾上皮细胞系293T细胞中EGFR基因的启动子活性（以相对发光值表示）。
结果（1）C-33A、CaSKi、HeLa细胞中EGFR mRNA的表达水平均显著高于HcerEpic细胞（P<0.05），其中HeLa细胞中EGFR mRNA的表达水平最高；C-33A、CaSKi、HeLa细胞中miR-147a表达水平均显著低于HcerEpic细胞（P<0.01），其中HeLa细胞中miR-147a的表达水平最低。故选用HeLa细胞进行以下实验。（2）转染组、阴性对照组、空白对照组HeLa细胞的存活率分别为（63.1±1.2）%、（99.2±1.8）%、（100.0±1.5）%，克隆形成率分别为（51.3±0.3）%、（96.7±0.3）%、（100.0±0.3）%，穿膜细胞数分别为（12.3±3.1）、（44.3±4.5）、（48.3±2.5）个，上述指标转染组均显著低于阴性对照组、空白对照组（P<0.01）；转染组、阴性对照组、空白对照组HeLa细胞中EGFR mRNA的表达水平分别为0.32±0.04、0.97±0.06、1.00±0.04，EGFR蛋白的表达水平分别为0.32±0.03、0.57±0.03、0.62±0.03，转染组EGFR mRNA和蛋白的表达水平均显著低于阴性对照组、空白对照组（P<0.01）。（3）双荧光素酶报告基因实验检测显示，mimics-NC+EGFR-WT组、mimics-NC+EGFR-Mut组、mimics-miR-147a+EGFR-WT组、mimics-miR-147a+EGFR-Mut组293T细胞中EGFR基因的启动子活性分别为3.57±0.37、3.83±0.25、1.09±0.13、3.63±0.46，mimics-miR-147a+EGFR-Mut组显著高于mimics-miR-147a+EGFR-WT组（P<0.01），mimics-miR-147a+EGFR-WT组显著低于mimics-NC+EGFR-WT组（P<0.01），mimics-NC+EGFR-WT组与mimics-NC+EGFR-Mut组比较无显著差异（P>0.05）。
结论miR-147a表达上调通过调控靶基因EGFR的表达抑制子宫颈癌HeLa细胞的增殖和侵袭。