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目的：建立牛视网膜毛细血管周细胞原代培养的方法。方法：以酶消化法原代培养牛视网膜毛细血管周细胞，用透射电镜和免疫细胞化学法对细胞进行鉴定。结果：培养的周细胞贴壁生长，胞体肥大，呈不规则状、有较多突起。细胞生长缓慢，呈现非接触抑制的重叠状生长。电镜下周细胞核大、不规则、有切迹，可见多个核仁。细胞表面有微绒毛，胞质内有丰富的细胞器，无Ⅷ因子小体;免疫细胞化学显示细胞呈平滑肌肌动蛋白（α-SMA）阳性，Ⅷ因子相关抗原阴性。结论：酶消化法原代培养牛视网膜周细胞是一种稳定、可靠的方法。