【摘 要】
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本研究利用重组质粒pET-32a-NJ-G666(针对新泽西型水疱性口炎病毒截断的G蛋白基因片段约666 bp),将其转化至Rosetta宿主菌,用0.6 mmol/LIPTG在30℃诱导4h,经10％聚丙烯酰胺凝胶
【机 构】
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青岛农业大学动物科技学院,北京出入境检验检疫局,北京森康生物技术开发有限公司
【基金项目】
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青岛农业大学研究生创新计划资助项目;
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本研究利用重组质粒pET-32a-NJ-G666(针对新泽西型水疱性口炎病毒截断的G蛋白基因片段约666 bp),将其转化至Rosetta宿主菌,用0.6 mmol/LIPTG在30℃诱导4h,经10％聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,表达的重组蛋白分子质量与预期的30 kDa相符.在此基础上,利用纯化的重组蛋白作为抗原包被酶标板,建立了可检测新泽西型VSV抗体的间接ELISA方法.该方法检测东部马脑脊髓炎和马西尼罗病毒的阳性血清均为阴性,且板内和板间变异系数均小于10％.试验结果表明,建立的间接ELISA方法特异性强、重复性好,为新泽西型VSV血清抗体的检测提供了依据.
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