研究内质网应激及c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)所致肾小球足细胞损伤中的作用及白藜芦醇对其的保护机制。
方法小鼠足细胞诱导分化，随机分为对照组(C组)、高AngⅡ组、白藜芦醇干预(AngⅡ+Res)组、JNK通路特异抑制剂SP600125干预组，对照组采用RPMI1640培养，AngⅡ浓度为10-8 mol/L，白藜芦醇浓度为20 μmol/L, SP600125浓度为20 μmol/L。作用48 h后，倒置显微镜下观察各组足细胞形态，并用流式细胞仪测定细胞凋亡率，实时定量聚合酶链反应(PCR)和Western blotting法分别测定葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和磷酸化JNK(p-JNK)mRNA及蛋白的表达。各组间数据比较采用t检验。
结果与对照组相比，Ang Ⅱ组细胞凋亡率升高，GRP78 mRNA、p-JNK mRNA的表达增多(t=9.318、6.063、7.160，均P<0.05)，且GRP78蛋白、p-JNK蛋白的表达也上调(GRP78蛋白和p-JNK蛋白Ⅰ、Ⅱ条带t=4.116、5.085、5.117，均P<0.05)。与AngⅡ组相比，AngⅡ+Res干预组足细胞凋亡率降低，GRP78 mRNA、蛋白表达减少(t=14.328、4.530、3.977，均P<0.05)，p-JNK mRNA、p-JNK蛋白的表达亦减少(mRNA和蛋白Ⅰ、Ⅱ条带t=4.590、4.990、4.991，均P<0.05)。与AngⅡ组相比，SP600125干预组足细胞凋亡率降低(t= 10.756，P<0.05)，p-JNK mRNA、蛋白的表达亦减少(mRNA和蛋白Ⅰ、Ⅱ条带t=5.408、4.901、4.886，均P<0.05)。
结论高AngⅡ可在体外诱导足细胞发生凋亡，通过了内质网应激途径，并由JNK通路引起细胞凋亡。白藜芦醇通过抑制内质网应激通路及JNK通路的激活抑制了足细胞的凋亡。