【摘 要】
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目的观察大鼠肺泡上皮细胞CCL149自噬对内质网应激的影响。方法将绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(GFP-LC3)质粒导入CCL149细胞，筛选出稳定表达GFP-LC3的细胞株。在分别加入自噬激活剂雷帕霉素和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)后，观察大鼠肺泡上皮细胞经缺氧复氧2、4、6 h时细胞自噬变化及相应的内质网应激反应。结果在缺氧复氧2、4、6 h这3个时间点，加入3-MA组自噬基因G
【机 构】
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目的观察大鼠肺泡上皮细胞CCL149自噬对内质网应激的影响。
方法将绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(GFP-LC3)质粒导入CCL149细胞，筛选出稳定表达GFP-LC3的细胞株。在分别加入自噬激活剂雷帕霉素和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)后，观察大鼠肺泡上皮细胞经缺氧复氧2、4、6 h时细胞自噬变化及相应的内质网应激反应。
结果在缺氧复氧2、4、6 h这3个时间点，加入3-MA组自噬基因GFP-LC3表达量显著低于对照组(t＝6.317，P＝0.024；t＝8.583，P＝0.013；t＝6.341，P＝0.026)，Beclin-1表达量显著低于对照组(t＝4.658，P＝0.039；t＝7.120，P＝0.022；t＝10.320，P＝0.000)，p62表达量显著低于对照组(t＝5.906，P＝0.015；t＝7.032，P＝0.019；t＝7.072，P＝0.032)，而内质网应激基因免疫球蛋白结合蛋白(BIP)表达量显著高于对照组(t＝5.988，P＝0.012；t＝9.473，P＝0.004；t＝12.863，P＝0.000)，X-盒结合蛋白(XBP-1)表达量显著高于对照组(t＝4.285，P＝0.043；t＝9.563，P＝0.008；t＝10.531，P＝0.000)，C/EBP同源蛋白(CHOP)表达量显著高于对照组(t＝5.477，P＝0.031；t＝8.373，P＝0.016；t＝8.954，P＝0.025)；加入雷帕霉素组自噬基因GFP-LC3表达量显著高于对照组(t＝4.502，P＝0.046；t＝10.000，P＝0.010；t＝4.983，P＝0.041)，Beclin-1表达量显著高于对照组(t＝5.161，P＝0.029；t＝5.767，P＝0.029；t＝9.342，P＝0.012)，p62表达量显著高于对照组(t＝6.687，P＝0.026；t＝7.084，P＝0.016；t＝9.767，P＝0.000)，而内质网应激基因BIP表达量显著低于对照组(t＝7.245，P＝0.016；t＝8.432，P＝0.005；t＝12.562，P＝0.000)，XBP-1表达量显著低于对照组(t＝6.255，P＝0.022；t＝8.450，P＝0.029；t＝8.365，P＝0.035)，CHOP表达量显著低于对照组(t＝7.048，P＝0.014；t＝11.566，P＝0.000；t＝10.144，P＝0.000)。
结论在大鼠肺泡上皮细胞缺血缺氧早期，增强细胞自噬可减弱内质网应激。
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