【摘 要】
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为了检测缝隙连接蛋白(Cx)43和Cx45组成的多种异型缝隙连接通道和磷酸化对缝隙连接(GJ)里细胞通讯的调节作用,将转染了编码为Cx43或Cx45的DNA后的Hela细胞放置在一起共同培养
【机 构】
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武汉大学人民医院心内科,广西医科大学第一附属医院心内科,美国印地安那大学-普度大学Krannert心脏病研究所
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为了检测缝隙连接蛋白(Cx)43和Cx45组成的多种异型缝隙连接通道和磷酸化对缝隙连接(GJ)里细胞通讯的调节作用,将转染了编码为Cx43或Cx45的DNA后的Hela细胞放置在一起共同培养组成双侧和单侧异型GJ通道.显微注射荧光素黄(LY)后,利用紫外光检测经200 nmol/L十四(烷) 酰佛波醇乙酸酯(TPA)处理前后由Cx43和Cx45所组成的多种异型GJ通道对荧光染料的偶联率.结果: 在不同的GJ中, 同型GJ通道Cx43(HoCx43)偶联率最高.单侧异型GJ通道Cx43(MH43)和单侧异型GJ通道Cx45(MH45)的偶联率较之相关的HoCx43和同型GJ通道Cx45(HoCx45)低.从Cx45侧注入荧光染料的MH45偶联率较之从Cx43/45侧注射的MH45、双侧异型GJ通道Cx43/45(BH43/45)和HoCx45等的偶联率都低.TPA处理后HOCx43的偶联率降低,而当Cx43和Cx45组合成异型BH43/45和MH43通道其偶联率下降更显著.结论: Cx43和Cx45共同表达可构成BH43/45、MH43和MH45等通道,而这些异型GJ通道可降低细胞间通信和对磷酸化的敏感性.有关MH45通道,其偶联率大小决定于荧光染料的注射方向, 此可能与心律失常再折返的解剖学的机制有关.
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