【摘 要】
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目的：构建带有Myc标签的Thr-213、Thr-235、Ser-404磷酸化位点突变为Ala的Tau蛋白真核表达质粒,并在真核细胞中表达Myc-Tau3m蛋白。方法：利用重组PCR方法得到Thr-213、Thr-235
【机 构】
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解放军总医院内分泌科,军事医学科学院生物工程研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金（81372161,31470773,81272231）
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目的：构建带有Myc标签的Thr-213、Thr-235、Ser-404磷酸化位点突变为Ala的Tau蛋白真核表达质粒,并在真核细胞中表达Myc-Tau3m蛋白。方法：利用重组PCR方法得到Thr-213、Thr-235、Ser-404磷酸化位点突变为Ala的编码序列,将其插入经Bam HⅠ和KpnⅠ酶切的p XJ40-Myc表达载体,在人293T细胞中转入空载体和重组质粒,利用Western印迹检测其表达及功能。结果：测序和酶切结果证实Myc-Tau3m真核表达质粒构建成功,转染293T细胞后获得表达,
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