含p21启动子的荧光素酶报告基因的构建和活性测定

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目的:克隆p21基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,并检测其活性.方法:采用PCR技术从人乳腺癌细胞系MCF-7基因组中扩增出p21启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,确定所扩增的DNA序列,在293T细胞中检测其活性.结果:测序结果表明扩增的p21启动子序列正确,活性实验表明构建的报告基因具有启动子活性,雌激素受体(ER)α能以剂量依赖的方式升高p21报告基因的转录.结论:克隆了p21启动子,为ERα共调节子的功能研究提供了重要基础.
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