【摘 要】
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目的:探讨人外周血单核细胞来源的树突状细胞(Dendritic cells,DC)与人白血病细胞K562融合后,能否诱导出p210蛋白特异性的CTL,为DC疫苗的临床应用提供理论基础.方法:外周血来
【机 构】
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军事医学科学院放射医学研究所三室,北京100850
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目的:探讨人外周血单核细胞来源的树突状细胞(Dendritic cells,DC)与人白血病细胞K562融合后,能否诱导出p210蛋白特异性的CTL,为DC疫苗的临床应用提供理论基础.方法:外周血来源的贴附单核细胞,在人GM-CSF(1000U/ml)和IL-4(1000U/ml)作用下,培养5～7天后,与人白血病细胞K562进行融合,融合细胞再与自体的淋巴细胞共同孵育10～14天,采用乳酸脱氢酶释放试验分析其对p210蛋白阳性细胞的杀伤效果.为显示融合效果,对照试验组K562细胞用绿色荧光蛋白(GFP)进行标记.结果:贴附的单核细胞在GM-CSF和IL-4作用下,培养5天后,约有70%的DC产生,流式细胞仪分析表明,这些细胞为HLA-DR、HLA-A,B,C以及CD1α阳性,并高表达共刺激分子CD80和CD86.DC与GFP标记的K562细胞融合24h后,表达GFP蛋白的细胞中约有60%呈现出典型的DC形态特征.乳酸脱氢酶释放试验结果表明,融合细胞能激活淋巴细胞产生p210蛋白特异性的CTL.结论:树突状细胞与肿瘤细胞融合后,能诱导出肿瘤特异性的CTL,显示出DC疫苗抗肿瘤作用的广泛前景.
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