人源性噬菌体抗体库中抗CEA单抗的筛选与初步鉴定

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目的探讨利用噬茵体抗体库技术制备抗CEA的人源性单抗的可行性.方法以纯化的CEA为抗原,应用噬菌体表面呈现技术,通过3轮亲和富集及2轮淋巴细胞吸附实验,从已构建好的人源性噬茵体抗体库中筛选出抗CEA的人源性单抗,随机挑出10株单克隆在大肠杆茵中进行表达,并采用ELISA、SDS-PAGE及基因测序进行初步鉴定.结果ELISA显示有9株单抗具有与CEA特异性结合的能力,挑选其中2株具有较高亲和力的单克隆,经12%SDS-PAGE蛋白电泳,在分子量约为25kd处可见一新增蛋白带,与基因编码蛋白的理论计算值相符
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