【摘 要】
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目的 构建人分化型胚胎软骨发育基因1 （DEC1）的短发卡RNA （shRNA）慢病毒表达载体并建立稳定敲减DEC1表达的人脑胶质瘤细胞株T98G。方法 根据GenBank中DEC1基因cDNA序列设计合成两
【机 构】
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第四军医大学西京医院神经外科,第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室
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目的 构建人分化型胚胎软骨发育基因1 （DEC1）的短发卡RNA （shRNA）慢病毒表达载体并建立稳定敲减DEC1表达的人脑胶质瘤细胞株T98G。方法 根据GenBank中DEC1基因cDNA序列设计合成两条特异性shRNA序列，同时设计1条非特异性序列作为阴性对照，分别克隆到PsiLVRU6MP质粒载体内，经酶切电泳、DNA测序鉴定后包装成慢病毒颗粒。再以3组慢病毒感染胶质瘤细胞系T98G，用嘌呤霉素筛选后，荧光显微镜下观察mCherry的表达，Western Blot检测各组DEC1蛋白的表达水平
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