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目的
探讨氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)对人肝窦内皮细胞(HLSECs)舒张功能和窗孔调节的影响。
方法用100 mg/L浓度的oxLDL刺激HLSECs (oxLDL组),培养24 h,另设正常对照组(不经处理)。使用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting法从基因和蛋白水平检测2组HLSECs中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素1 (ET-1)和小凹蛋白(Cav-1)的表达水平,扫描电镜观察100 mg/L oxLDL干预下HLSECs窗孔分布、数量和直径的变化特点。采用t检验进行数据分析。
结果与对照组相比,oxLDL组HLSECs ET-1和Cav-1 mRNA表达分别升高了2.62倍和2.49倍(2.62± 0.32比1.00±0.00和2.49±0.27比1.00±0.00),而eNOS mRNA表达则下降了45%(0.55±0.12比1.00± 0.00) ;ET-1和Cav-1蛋白表达升高了2.31倍和2.96倍(1.34±0.10比0.58±0.03和0.71±0.03比0.24± 0.02),而eNOS蛋白表达则降低了54%(0.34±0.02比0.74±0.04),两组间差异均有统计学意义(t=32.54、26.62、6.29、16.71、22.09、15.20,均P<0.05)。与对照组比较,oxLDL组HLSECs窗孔分布稀疏,数量减少,窗孔直径变小,有的区域甚至消失。
结论oxLDL可上调HLSECs ET-1和Cav-1的表达、下调eNOS的表达,引起HLSECs舒张功能失调和发生去窗孔化。