猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp12的原核表达及间接ELISA方法的建立

来源 :动物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snailswuya
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
Nsp12作为猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)非结构蛋白,其诱导产生的抗体能作为检测野毒感染的良好指标.用RT-PCR方法获得PRRSV Nsp12的基因,用原核表达系统pET-32a(+)在BL21(DE3)细胞中表达Nsp12,通过亲和层析纯化蛋白.用表达的Nsp12建立检测PRRSV抗体的间接ELISA方法.结果显示,获得了Nsp12基因及原核表达Nsp12,建立了检测抗Nsp12抗体的间接ELISA方法,阴性、阳性临界值为OD 450 nm值为0.227,92份血清样品的检测结果表明建立的ELISA方法特异性较好,为猪场监测PRRSV野毒感染提供了技术支持.
其他文献
针对东北农牧交错区畜禽粪污养分资源利用率低、排放量大等问题,试验引进丹麦液体肥施用技术,设置不施氮肥(CK)、常规施肥(FP)、67.5 t·hm-2液体牛粪(N0PKM)、减氮40%配施67.5 t·hm-2液体牛粪(N1PKM)、减氮20%配施67.5 t·hm-2液体牛粪(N2PKM)共5个处理,探究减氮配施液体牛粪对寒地玉米花后期干物质积累和养分吸收转运规律的影响.结果表明,减氮配施液体牛粪有效提高玉米花后期干物质和养分积累及转运量和对籽粒的贡献率,增加作物产量,同时,降低土壤磷、钾盈余量,提高养
为了观察中药对奶牛乳房炎主要致病菌的体外抑菌效果,选取20味中药用水提法制备药液,测定水提液对主要病原菌的抑菌效果.结果表明,不同中药对不同病原菌的抑菌效果不同.五倍子、乌梅、黄芩、鹿蹄草、丹参、黄连、连翘、石榴皮、黄柏、大黄对产色葡萄球菌抑菌效果较好;五倍子、乌梅、黄芩、黄连对金黄色葡萄球菌抑菌效果较好;五倍子、乌梅对大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌抑菌效果较好;乌梅、黄连、黄柏、五倍子、鹿蹄草对于无乳链球菌抑菌效果较好.五倍子和乌梅组成的组方对所有病原菌都有较好的抑菌效果.
为了建立一种快速、准确、敏感的非洲猪瘟病毒p72和CD2v基因双重荧光定量PCR方法,根据GenBank公布的ASFV基因序列,针对p72基因保守区域和CD2v基因保守区域分别设计特异性引物和探针,并且对反应条件进行了优化.结果显示,该方法对ASFV p 72、CD 2v基因呈现特异性扩增,对猪瘟病毒(CSFV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪肺炎支原体均无扩增.建立的方法可检出低至
猫毛滴虫病是一种全球流行的新发胃肠道疾病,由胎儿三毛滴虫寄生于猫肠道内引起,感染猫通常无临床症状或表现为慢性大肠性腹泻.目前,国内对该病的关注不够,相关研究非常少.论文对猫毛滴虫病的发现历史、病原与生活史、致病性、临床症状、流行、诊断、治疗、预后及预防等进行全面综述,同时对猫感染的其他毛滴虫如人五毛滴虫和口腔毛滴虫等做一简要介绍,以期为该病的研究及防控提供参考.